Иммунный блот положительный: суть и значение

Как длительный иммунный блок положительно влияет на организм

Иммунный блок положительный означает, что организм имеет достаточно сильную и эффективную иммунную систему, способную бороться с различными инфекциями и болезнями. Длительный иммунный блок положительно влияет на организм, обеспечивая его защитой от вредных воздействий и помогая поддерживать оптимальное здоровье.

Когда иммунная система функционирует нормально, она может эффективно бороться с вирусами, бактериями и другими патогенными микроорганизмами, предотвращая их размножение и распространение в организме. Это помогает снизить риск заболеваний и поддерживает общую защиту организма.

Длительный иммунный блок положительно влияет на организм следующим образом:

  1. Укрепление иммунной системы. Длительный иммунный блок позволяет организму укрепить иммунную систему, делая ее более устойчивой к инфекциям и болезням. Это достигается через активацию различных клеток и молекул иммунной системы, которые борются с патогенами и стимулируют процессы иммунного ответа.
  2. Повышение антител в крови. Длительный иммунный блок способствует повышению уровня антител в крови. Антитела являются ключевой частью иммунной системы и помогают организму распознавать и нейтрализовать вредные вещества и микроорганизмы. Высокий уровень антител в крови обеспечивает дополнительную защиту организма от инфекций и болезней.
  3. Стимуляция иммунной памяти. Длительный иммунный блок также стимулирует иммунную память – способность иммунной системы запоминать патогены, с которыми она уже сталкивалась. Это позволяет организму быстрее и эффективнее реагировать на повторные атаки инфекций.
  4. Снижение риска хронических заболеваний. Сильный и длительный иммунный блок может помочь снизить риск развития хронических заболеваний, таких как сердечно-сосудистые заболевания, различные виды рака и автоиммунные заболевания. Это связано с тем, что иммунная система играет важную роль в поддержании здоровья и функционировании организма в целом.

В целом, длительный иммунный блок положительно влияет на организм, улучшая его защитные функции и способность бороться с инфекциями. Поддержание здорового образа жизни и активная профилактика помогут укрепить иммунную систему и предотвратить множество заболеваний.

Сколько дней делается анализ на ВИЧ в России

В России на данный момент стандартной процедурой лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является использование метода ИФА с последующим подтверждением специфичности антител к вирусу в реакции иммунный блот (ИБ). Иммунный блот, или вестерн-блот, — наиболее чувствительный и специфичный метод определения антител к вирусу иммунодефицита, состоит из нескольких этапов: электрофорез белков в геле для разделения их по длине, затем перенос белков на нитроцеллюлозную мембрану (подготовка тест-системы) и детекция взаимодействий со специфичными к данным белкам антителами крови пациента. При необходимости подтверждения положительного результата ИФА с помощью иммуноблоттинга результат будет готов в среднем через 10 дней.

Алгоритм дообследования включает следующие этапы:

  • при получении положительного результата ИФА ВИЧ, данный анализ проводят еще дважды с той же сывороткой и той же тест-системой;
  • если из последующих ИФА хотя бы 1 положительный (2 из 3 анализов), сыворотка направляется в референс-лабораторию (при региональных СПИД-центрах), где снова повторяют ИФА, но уже на тест-системе другого производителя);
  • если полученный результат положительный, то проводится исследование в иммунном блоте;
  • если же отрицательный — проводят тест в третьей, отличной от предыдущих (по составу антигенов), тест-системе (повторный отрицательный результат говорит об отсутствии антител к ВИЧ, положительный — о необходимости проведения ИБ).

Выделяют три возможных результата реакции иммунный блот согласно критериям ВОЗ:

  • ИБ положительный (обнаружение антител к двум или трем гликопротеинам ВИЧ) интерпретируется как наличие антител к вирусу иммунодефицита (есть ВИЧ-инфекция);
  • ИБ отрицательный (не обнаружены антитела ни к одному из антигенов) интерпретируется как отсутствие антител к вирусу (нет ВИЧ-инфекции);
  • ИБ неопределенный — обнаружены антитела к одному гликопротеину и/или каким-нибудь протеинам вируса. При неопределенном иммунном блоте рекомендуется повторить обследование через 2 недели, а затем через 3 и 6 месяцев после первого, так как возможна сероконверсия, то есть начало набора антител. Отрицательный результат после дообследования интерпретируется как отсутствие инфекции. Если результат по-прежнему неопределенный — требуется проведение дополнительных тестов.

Дополнительными методами могут быть выявление антигена р24, РНК вируса или провирусной ДНК (готовность анализов через 2–7 дней). Если результат анализов дополнительными методами положительный, то проводится повторное обследование на антитела (ИФА) через 2 недели от первоначального и далее каждые две недели до подтверждения наличия антител. В некоторых странах выявление провирусной ДНК или вирусной РНК на данном этапе подтверждает наличие ВИЧ-инфекции и не требует дополнительных исследований.

Таким образом, время получения результата исследования на ВИЧ варьирует от 20 минут до 10 дней и зависит от используемого теста.

Если окончательный результат анализа положительный, необходимо обратиться в центр СПИДа для постановки на наблюдение у инфекциониста, а также дообследования и назначения антиретровирусной терапии (АРТ).

Если же результат отрицательный, необходимо предпринимать дальнейшие действия для профилактики инфицирования, например, использование барьерного метода контрацепции (презерватив), а также прием препаратов, предотвращающих передачу вируса в группах высокого риска.

Рекомендации CDC (Centers for Disease Control and Prevention) призывают тестировать каждого в возрасте от 13 до 64 лет как минимум однократно в ходе диспансеризации. Люди из групп высокого риска должны тестироваться ежегодно или чаще.

К факторам, увеличивающим вероятность заражения ВИЧ, относятся:

  • незащищенный вагинальный или анальный секс с ВИЧ-позитивным партнером, не получающим терапию или с партнером, чей статус неизвестен;
  • использование общих игл и шприцов при употреблении инъекционных наркотиков;
  • секс в обмен на деньги или наркотики;
  • наличие заболеваний, передающихся половым путем;
  • наличие гепатитов или туберкулеза;
  • секс с партнером, имеющим риски, перечисленные выше.

Мужчины, которые имеют секс с мужчинами, должны обследоваться на ВИЧ раз в 3-6 месяцев.

Беременные женщины также должны обследоваться, так как это позволит, в случае положительного результата, своевременно начать прием АРТ и предотвратить передачу инфекции от матери к ребенку.

Так или иначе, знать свой ВИЧ-статус важно, чтобы быть в безопасности самому и обезопасить своих близких от возможного инфицирования.

Исследование при беременности

Будущей матери назначают иммунный и линейный блоттинг, если получен положительный результат на ВИЧ методом ИФА. Если блот подтвержден, пациентка больна СПИДом. В этом случае начиная с 14 недели беременности назначают терапию, предупреждающую инфицирование ребенка.

Может ли ошибиться специалист при выполнении исследования сыворотки крови во время беременности, спрашивают пациентки у лечащего врача. Он обязан выдать на руки беременной женщине копии анализов ПЦР, ИФА для устранения сомнений в их достоверности.

При постановке иммуноблота иногда возникают проблемы, но если ИФА, блот и ПЦР — положительные, диагноз ВИЧ-инфекции подтверждается окончательно. Вероятность получения ложноположительного анализа при беременности велика. В случае если ИФА (+), а иммуноблот (-), женщине предлагают пересдать сыворотку крови.

Мировая статистика насчитывает боле 38 миллионов человек с ВИЧ-инфекцией. Как бы страшно не звучали эти цифры – с каждым годом болезнь поддается лечению. Средства защиты, профилактики, специальные препараты обеспечивают счастливую и длинную жизнь ВИЧ-инфицированному населению. Больше всего болезнь превалирует в странах со средним и низким уровнем жизни. В ВИЧ рейтинг входят государства Центральной Азии, Восточной Европы, Африки, Ближнего Востока.

Некоторые люди, узнав о том, что заражены ВИЧ инфекцией совершают самоубийства. Бывают случаи, когда человек еще точно не знает, болен он или нет, но уже приговаривает себя к смерти.

Но каждый должен знать: жизнь одна и со всем можно и нужно бороться.

Часто даже самые лучшие приборы, клиники и специалисты могут допустить погрешность. Поэтому вероятность ошибки анализа на ВИЧ – есть.

Если вы собрались сдать анализы вместе со своим половым партнером, то вам необходимо знать информацию указанную в статье. Сегодня мы дадим ответ на следующие вопросы:

  • Что влияет на анализы ВИЧ. Как подготовиться к сдаче?
  • Статистика ложноположительных анализов на ВИЧ.
  • Ложный анализ на ВИЧ причины.
  • ВИЧ положительный, что это значит?
  • Ложный анализ на ВИЧ, кто виноват?

Врачи считают, что к ключевым группам ВИЧ больных относятся:

«Геи, трансгенедеры, наркоманы, заключенные тюрьмы. Люди, работающие в сфере секс услуг. Как правило, они совершенно не соблюдают гигиену. Да и про какую гигиену может идти речь, если мозг решает только потребность влечения. От ВИЧ эпидемии страдают женщины и подростки африканских стран. Поскольку уровень держав не позволяет проводить должное лечение. Статистика умирающих от ВИЧ растет.

Иммунный блоттинг

Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.

Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля). На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.

ИБ считается положительным если:

  • по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
  • по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.

В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.

При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.

При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:

  • онкологических заболеваниях;
  • беременности;
  • частых трансфузиях крови.

В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).

Что делать, если ваш вестерн-блот получился «злым»?

Проблема Возможная причина Как исправить
Нет полос Не прошел перенос Проверить, что мембрана надлежащим образом смачивается буфером или метанолом и что между мембраной и гелем есть хороший контакт.
Взяли неподходящие вторичные антитела Проверить соответствие вторичных и первичных антител.
Антитела испортились, или у них закончился срок годности Проверить срок годности, приобрести свежие антитела, следовать рекомендациям по хранению и избегать циклов замораживания-оттаивания.
Произошло загрязнение азидом натрия Убедиться, что используемые буферы не содержат азид натрия, поскольку он может подавлять сигнал пероксидазы хрена.
Слабые полосы Низкое связывание белков с антителами Свести количество промывок к минимуму. Уменьшить концентрацию NaCl в буфере для блоттинга и растворе антител.
Взяли недостаточное количество антител, или их аффинность к анализируемому белку слишком низкая Увеличить концентрацию антител в 2–4 раза.
Взяли слишком мало белка Увеличить количество белка, наносимого на гель.
Испортился конъюгат Смешать фермент и субстрат в пробирке. Если цвет не развивается или получается слабым, сделать свежие реагенты или купить новые.
Проявились лишние полосы Произошло неспецифическое связывание первичных антител Уменьшить концентрацию первичных антител и количество общего белка, загружаемого в гель. Использовать моноспецифические антитела.
Произошло неспецифическое связывание вторичного антитела Провести контроль только с вторичным антителом (исключая первичное антитело). Если появляются полосы, выбрать альтернативное вторичное антитело.
Произошло неспецифическое связывание первичных или вторичных антител Добавить 0,1–0,5% Tween 20 к раствору антител и увеличить его концентрацию в промывочном буфере. Увеличить количество промывок. Увеличить концентрацию NaCl в буфере для блоттинга.
Анализируемый белок деградировал Свести к минимуму циклы замораживания/оттаивания образца. Добавить ингибиторы протеазы в образец перед хранением. Сделать свежие образцы.
Возможно, вы нашли что-то интересное! Если лишние полосы расположены выше искомого белка, это могут быть модификации, связанные с фосфорилированием или ацетилированием (масса белка увеличивается незначительно) либо с убиквитинированием или сумоилированием (масса белка увеличивается примерно на 20 КДа).
Высокий фон Произошло неспецифическое связывание первичных антител Подобрать оптимальную концентрацию молока и NaCl в растворе первичного антитела. Уменьшить концентрацию антител.
Молоко может содержать антиген-мишень или эндогенный биотин. Антитела распознали молочный белок. Заменить при блокировке свободных участков на мембране молоко на 3%-ный бычий сывороточный альбумин (BSA).
Недостаточное количество промывок Увеличить количество промывок или концентрацию Tween 20 в промывочном буфере.
Проявились неровные пятна Произошло загрязнение реагентов твердыми частицами или бактериями Приготовить свежие реагенты.
Во время инкубации или промывки было недостаточное количество раствора Проверить, что мембрана полностью погружена в раствор на данных этапах.
На мембрану во время переноса попали пузырьки воздуха Аккуратно удалить пузырьки воздуха, особенно во время переноса.
Перемешивание во время инкубации было неравномерным Использовать качалку или шейкер.
Грязное оборудование Помыть блок электрофореза.
Произошла агрегация пероксидазы хрена Отфильтровать конъюгат и удалить агрегаты.
Была сделана слишком длинная выдержка Уменьшить время выдержки.

Советы по использованию иммунного блота положительного

Иммунный блот положительный — это важный и мощный инструмент в области биохимии и молекулярной биологии, который широко используется для исследования присутствия конкретного антигена в образцах. Вот несколько советов, которые помогут вам использовать этот метод эффективно:

Соблюдайте все протоколы и инструкции: Иммунный блот положительный требует точного соблюдения протоколов и инструкций. При использовании этого метода вам необходимо быть внимательным и следовать всем указаниям производителя.

Выберите правильные антитела: Для проведения иммунного блота положительного необходимо выбрать антитела, которые специфичны к исследуемому антигену

Это поможет избежать ложно-положительных результатов и повысит точность ваших экспериментов.

Оцените качество образца: Перед проведением иммунного блота положительного важно убедиться в качестве вашего образца. Он должен быть чистым, экстракция белка должна быть эффективной, исключены должны быть повреждения образца и прочие факторы, которые могут повлиять на результаты.

Проведите негативный контроль: Убедитесь, что проводите негативный контроль для проверки специфичности антитела и исключения ложно-положительных результатов

Для этого используйте образец, в котором ожидается отсутствие исследуемого антигена.

Оптимизируйте концентрацию антитела: Подберите оптимальную концентрацию антитела для вашего исследования. Это может потребовать проведения пробных экспериментов с разными концентрациями антитела для достижения максимальной специфичности исследования.

Анализируйте результаты с помощью программного обеспечения: Важно использовать программное обеспечение для анализа результатов иммунного блота положительного. Это поможет вам качественно оценить присутствие исследуемого антигена в образце и сделать выводы о вашем эксперименте.

Проведите повторные эксперименты: Для повышения достоверности ваших результатов рекомендуется провести повторные эксперименты. Это поможет проверить воспроизводимость ваших данных и избежать случайных ошибок.

Использование иммунного блота положительного требует внимательности и точности. Следуя этим советам, вы сможете получить надежные и качественные результаты, которые помогут вам в вашем исследовании.

Сколько по времени делается анализ крови и слюны на ВИЧ-инфекцию

Результат теста нуклеиновых кислот (количественное определение РНК вируса методом ПЦР или анализ на вирусную нагрузку) подтверждает наличие вируса в организме и определяет его количество в исследуемом образце. Тест достаточно дорогой и не применяется для скрининга в рутинной практике, но может использоваться, если возможный риск заражения оценивается как высокий.

Тестирование позволяет определить у части пациентов наличие инфекции уже начиная с 7–10 дня после заражения. Прием препаратов доконтактной (ДКП) или постконтактной профилактики (ПКП) заражения ВИЧ может влиять на результат анализа за счет снижения концентрации РНК вируса до неопределяемых значений. Длительность выполнения данного анализа от 2 до 7 дней.

Тест на антиген/антитела (метод иммуноферментного анализа — ИФА) определяет как наличие антигена вируса (р24), так и антител к нему. Антигены — это чужеродные белки, которые заставляют нашу иммунную систему активироваться и вырабатывать антитела. То есть антитела у человека образуются в ответ на попадание антигенов вируса в организм. При ВИЧ-инфекции антиген р24 обнаруживается в крови до того, как сформировались антитела к нему.

Как долго делается анализ ИФА крови на ВИЧ

ИФА проводятся в лаборатории с венозной кровью и могут выявить антитела к ВИЧ и р24 антиген с 18–45 дня после инфицирования. В среднем, результаты анализа готовы на следующий день после забора крови. В настоящее время ИФА наиболее распространенный метод диагностики ВИЧ-инфекции.

Большинство всех экспресс-тестов основано на выявлении антител к вирусу в крови или слюне. Достоверность результата таких тест-систем составляет 99%. Экспресс-тесты могут проводиться как в условиях лаборатории (с венозной кровью), так и дома (кровь из пальца или слюна). Тесты, для выполнения которых используется венозная кровь, выявляют наличие антител быстрее тестов, где используется кровь из пальца или слюна.

Наборы для самотестирования по слюне предоставляют быстрый результат — через 20 минут. Одна из одобренных FDA тест-систем — OraQuick in-home HIV-test наиболее популярна. Она проста в использовании, представляет собой тест-полоску и контейнер с жидкостью-реагентом в стерильной упаковке. Такие наборы для тестирования можно приобрести в магазинах или онлайн (средняя стоимость около 30–40$). Экспресс-анализы обычно способны выявить ВИЧ-инфекцию с 23–90 дня после контакта. Если при проведении экспресс-тестов получен положительный результат, необходимо лабораторное подтверждение с помощью последующего тестирования методом ИФА.

О ВИЧ

Возбудители заболевания бывают 1-ого и 2-ого типа. Продолжительный промежуток времени их присутствие у человека проходит незамеченным, дальше поражается в первую очередь иммунитет, затем другие системы человека.

При основном методе лабораторного диагностирования вируса иммунодефицита выявляются антитела к ВИЧ. Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе метода, он чувствителен (99,5% и выше) и специфичен (99,8% и выше). Кроме этого, при диагностировании ВИЧ с помощью ИФА определяют антиген р24.

Каждая тест-система имеет различные показатели, в связи с этим ими происходит определение различных белковых структур вирусных оболочек. Возбудители ВИЧ бывают двух подтипов: 1-ого и 2-ого или ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Вирусные частицы выглядят как сферическая форма, имеющая наружную фосфолипидную оболочку. Для 1-ого подтипа она имеет следующую молекулярную массу: gp120, gp41, gp160. 2-ой подтип содержит gp105, gp36, gp140. Для внутренней оболочки вируса молекулярная масса так же известна. Для 1-ого подтипа это — p55, p17, p24. Для 2-ого — p16, p25, p55.

Вообще результат ИФА может быть:

  • отрицательный;
  • ложноположительный;
  • ложноотрицательный;
  • сомнительный или неопределенный.

Методами диагностирования выявляются антигены, антитела.

ИФА находит хламидию, цитомегаловирус и даже паразитов

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность

Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты). Они бывают внушительных размеров (гельминты, а попросту – глисты) или маленькие (амебы, трихомонады, лямблии).

До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился. Для этого нужно лишь взять кровь из вены и найти антитела, которыми организм уже ответил на чужеродные антигены.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

Ошибочный результат на ВИЧ, причины

Современная медицина с каждым годом совершенствуется и не дает шансы иметь место ошибкам. Но по ряду различных причин ошибки случаются, при этом очень пугают, а после и радуют пациентов. Результаты анализов зависят от:

  • Человека, который сдает тест на ВИЧ.
  • От работы лаборатории и опыта врачей.
  • От аппаратной техники.

Иногда, виной появлению седых волос становятся технические ошибки. Неопытные медсестры и работники клиник могут не соблюдать режим хранения и транспортировки крови, взятой на анализ. Но такое случается все реже

Ложноположительный анализ у женщин может появляться из-за беременности. Если у беременной анализ показал положительный статус, ей необходимо встать на учет в СПИД-диспансер. Там проведут обследование и повторную сдачу. Через 3 месяца после первой сдачи крови, проводится вторая. Если показатели антител растут, значит это ВИЧ. Остается прежним – последствия беременности, и бояться нечего.

Сахарный диабет, коллагеноз – тоже причины неправильных показателей. На правильность результатов повлияет наличие онкологии или аутоиммунные болезни.

Ложный результат ВИЧ бывает и у детей. Женщины, которые имеют инфекцию, могут родить здорового ребенка. НО. Первые 18 месяцев в его крови будет повышенный показатель антител. Если дальше показатели пойдут на спад – ВИЧ нет.

На причины ложноположительного анализа на ВИЧ может повлиять еще несколько факторов:

  • Стресс, переутомление.
  • Неправильное питание, а как последствие – нарушение гормонального фона.
  • Тяжелая физическая нагрузка вызывает синтез гормона стресса. Перед исследованием стоит воздержаться от спорта.
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации