ПЦР у женщин

Когда анализ на ЗППП действительно необходим?

Если есть жалобы со стороны мочеполовых органов:

• появились или изменились выделения,
• есть боль или дискомфорт в нижней части живота,
• проблемы с мочеиспусканием, эрекцией (у мужчин) и менструациями (у женщин),
• не получается забеременеть.

Если есть эти и другие симптомы половых инфекций, тогда однозначно нужно обследоваться. Чем быстрее, тем лучше! Даже если вы уверены в себе и своем половом партнере или всегда пользуетесь барьерными методами контрацепции. Это как раз тот случай, когда работает правило — выявить на ранней стадии. Кстати, обнаружение какого-либо возбудителя ЗППП в крепких парах далеко не всегда является доказательством измены. Поэтому положительный ПЦР анализ ни в коем случае не должен быть причиной для скандала или разрыва отношений.

И еще целесообразно провериться на инфекции тем парам, которые планируют беременность. Что искать?

• Нужно удостовериться в отсутствии сифилиса и гонореи. Эти заболевания однозначно потребуют лечения, будучи обнаруженными во время беременности. Кроме того, высок риск прерывания беременности, врожденных уродств у ребенка, а также его инфицирования и болезней.
• Имеет смысл сдать анализ на хламидии и микоплазму гениталиум — выявление этих возбудителей во время беременности (даже если нет никаких симптомов) по существующим стандартам будет поводом к назначению антибиотиков. Поэтому лучше сдать анализы и, при необходимости, пролечиться заранее, чем во время беременности взвешивать гипотетические риски, оказавшись перед выбором: пить или не пить антибиотики.

А вот обследоваться просто так, без симптомов, на ВПЧ, герпес, цитомегаловирус, а также условные патогены (уреаплазму, микоплазму гоминис, кандиду) на этапе планирования беременности нет необходимости, так как результаты диагностики, какими бы они не оказались, ни на что не повлияют. Их не лечат, если нет признаков болезни.

Часто задаваемые вопросы

Вопрос: Где лучше сдавать анализ, в частной или государственной лаборатории?

Ответ: Проходить исследование следует в крупных и известных медицинских учреждениях. Как правило, они располагают наиболее современным и высокоточным оборудованием, качественными реактивами. Это повышает информативность теста и его точность. Кроме того, частные лаборатории обеспечивают пациентов расходниками, необходимыми для правильной доставки проб.

Вопрос: Сдавать мазок из уретры больно или нет? Все знакомые говорят по-разному.

Ответ: Ощущения сугубо субъективные. Как правило, женщины переносят процедуру легко. Мужчины испытывают дискомфорт, что спровоцировано анатомическими особенностями строения уретры. Задача лаборанта — не допустить попадание крови в образец, поэтому нужно быть готовым к незначительным и кратковременным неприятным ощущениям.

Вопрос: Сколько делается комплексный анализ ПЦР? Можно ли попросить сделать тест срочно?

Ответ: Продолжительность проведения анализа варьируется от 5 до 8 часов. Процесс обработки результатов может занять несколько больше времени. Рассчитывать на результат можно спустя 1‒2 суток. Крупные, оснащенные по последнему слову техники лаборатории могут предоставить протокол исследования через несколько часов. Вопрос срочности следует решать индивидуально.

Вопрос: Можно ли сдавать полимеразную цепную реакцию вместо пробы Манту? Например, собирая ребенка в детский сад?

Ответ: Возможность замены тестов следует обсуждать с руководством заведения. Некоторые детсады и школы действительно разрешают приносить результаты ПЦР на туберкулез родителям, которые не хотят делать своим детям Манту. Однако нужно учитывать, что достоверность анализа относительно микобактерий туберкулеза несколько снижена, что обусловлено различными концентрациями возбудителя в биологических средах организма. Чтобы получить точный результат, следует сдавать на ПЦР мазок из зева, мокроту либо мочу.

Вопрос: Почему ИФА показывает положительный результат, а ПЦР — отрицательный?

Ответ: Иммуноферментный анализ направлен на поиск в крови антител к специфическим антигенам инфекций. Метод отражает не только сам факт заражения, но и реакцию иммунитета на этот процесс. ПЦР ищет непосредственно возбудителя. ИФА будет положительным еще некоторое время после лечения антибиотиками, тогда как ПЦР покажет отсутствие инфекции в крови. Кроме того, на похожие антигены могут вырабатываться сходные антитела, что также обуславливает позитивный результат ИФА при негативном тесте ПЦР. Редко для дополнения теста ИФА приходится сдавать бакпосев.

Анализ крови ПЦР – что это такое?

Полимеразная цепная реакция представляет собой исследование, суть которого заключается в проведении амплификации (множественное копирование) генетического материала инфекционного агента. Данная методика дает возможность накопить ДНК или РНК выявляемых микроорганизмов в достаточном количестве. Оно необходимо для последующей идентификации генома и видовой принадлежности микроорганизмов. Благодаря ферментативной реакции множественного копирования молекул генетического материала ПЦР обладает высокой чувствительностью. Для выявления и идентификации достаточно нескольких фрагментов ДНК возбудителей в исследуемом биологическом материале.

Когда проводится анализ?

ПЦР получила широкое распространение в различных областях практической медицины. Исследование является одним из основных методов диагностики различных инфекционных заболеваний с половым путем передачи.

✅ ПЦР анализ на инфекции. Клинический случай №191

К ним относятся патологические процессы, вызванные:

• вирусами (герпетическая, папилломавирусная инфекция, ВИЧ СПИД, вирусные гепатиты с парентеральным путем передачи)
• специфическими бактериями (сифилис, гонорея, микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидиоз)
• простейшими (трихомониаз)

Полимеразная цепная реакция также может использоваться для диагностики инфекций, вызванных условно-патогенными грибами (кандидоз).

Какой материал исследуется?

Материалом, который используется для лабораторного исследования методом ПЦР, являются различные биологические жидкости организма человека.

В зависимости от локализации и характера диагностируемого заболевания, это может быть:

• мазок со слизистой оболочки урогенитального тракта
• моча
• сперма у мужчин
• отделяемое влагалища у женщин
• кровь

Анализы ПЦР мочи на ЗППП и половые инфекции. Клинический случай №155

Взятие материала проводится только в условиях манипуляционного кабинета медицинского учреждения соответствующим персоналом.

Обязательно соблюдаются правила асептики и антисептики. Они направлены на профилактику инфицирования пациента.

Подробную информацию про ПЦР анализ, что это такое и как правильно подготовиться к исследованию дает лечащий врач во время консультативного приема.

Расшифровка результата

В зависимости от методики проведения, а также диагностических целей ПЦР анализ может быть количественным и качественным. При проведении количественного исследования в результате указывает количество клеток возбудителя в единице объема материала.

При качественном исследовании – только факт наличия или отсутствия инфекции (в бланке анализа указывается положительный или отрицательный результат). Современные лаборатории могут проводить комплексное исследование на наличие сразу нескольких возбудителей инфекционной патологии. Хороший врач всегда ориентируется в информации про ПЦР анализ, что это такое, как делают и в какой лаборатории можно получить качественный результат проведенного исследования.

Обратитесь к нашим специалистам, и вам проведут качественную ПЦР диагностику.

Особенности проведения забора материала

В качестве материала для исследования ПЦР подходит любая жидкость биологического характера, выделения или ткани организма больного. Вид биоматериала и особенности его взятия будут зависеть от того, какую именно инфекцию или патологию нужно диагностировать. Для этого врач проанализирует все симптомы, присутствующие у человека.

• Для выполнения ПЦР на ВИЧ, гепатит или таксоплазмоз в клинической лаборатории берут венозную кровь.
• Анализ ПЦР на ИППП осуществляется посредством исследования забора выделений из внутренних половых органов, мазка из уретральной области, мочи (андроскрин).
• Для диагностики методом ПЦР на вирусы типа мононуклеоза, герпеса или цитомегаловируса биоматериалом служит моча или мазок из зева на инфекции.
• Забор жидкости из спинномозгового канала выполняется в случае необходимости анализа поражений, которые произошли в нервной системе пациента.
• Пульмонологическая диагностика использует скрининг плевральной жидкости и мокроты.
• Во время ПЦР анализа вероятных внутриутробных патологий и инфекций при беременности собирают фрагменты околоплодных вод или клетки плаценты.

Области применения анализа

В настоящее время в медицине и криминалистике, а также для клонирования генов и установления родственных связей применяют более десятка разновидностей амплификации. В ежедневной практике кровь на ПЦР назначают медицинские специалисты:

• педиатр;
• гинеколог;
• уролог;
• дерматовенеролог;
• инфекционист;
• фтизиатр;
• пульмонолог.

Генно-молекулярная диагностика успешно применяется в неонатологии. С помощью полимеразной цепной реакции выявляют возможное заражение младенцев внутриутробно и сразу после появления на свет. Для детей с риском инфицирования анализ проводят в первые 48 часов после рождения и повторно в возрасте 3-6 месяцев.

Кроме инфекционных заболеваний, Рolymerase Сhain Reaction помогает диагностировать наследственные аномалии и мутации. В перинатальный период методом ПЦР у будущего малыша можно обнаружить:

• гемофилию – нарушение свертываемости крови;
• болезнь Хантера – патологии обменных процессов;
• мусковидоз – нарушение внешнесекреторной функции желез;
• нервно-мышечную миодистрофию Дюшенна-Беккера;
• первичный иммунодефицит;
• синдром Альпорта – патологию почек.

PCR используют для определения мутантных генов и их РНК-продуктов в диагностике онкологических заболеваний. Высокая чувствительность молекулярного метода обеспечивает выявление онкопатологий в доклинической стадии, когда очаг опухоли не превышает 0,01 см3 в размерах.

По обнаруженным онкогенам, биологическим канцерогенам и антионкогенам диагностируют исходную стадию:

• онкогематологических болезней (рака крови и лимфатической системы);
• злокачественных образований молочных желез;
• аденокарциномы толстой кишки;
• меланомы;
• рака ротоглотки;
• наследственных форм рака.

Высокой онкогенностью обладают штаммы 16, 18, 31, 33, 35 ВПЧ (вируса папилломы человека). В 50% случаев вызывают карциному шейки матки у женщин – раковую опухоль эпителиальных клеток. Обнаружение неопластических клеток в доклинической стадии рака значительно повышает шансы на успешное лечение болезни.

Особую ценность ПЦР имеет для Службы крови. Метод позволяет определить заражение гепатитами, ВИЧ, сифилисом в бессимптомный инкубационный период. На этой стадии иммунная система еще не продуцирует антитела к возбудителям, и выявить заболевания с помощью серологических исследований невозможно.

Проверка донорской крови ПЦР предупреждает возможное инфицирование реципиента

Как подготовиться к анализу

К диагностике следует тщательно подготавливаться и соблюдать несколько простых правил:

1. Исключить возможность мочеиспускания за 3 часа до сдачи мазка.
2. За несколько суток (2-3 дня) до исследования исключить использования местных контрацептивных средств или вагинальных препаратов.
3. Воздержаться от половых контактов в течении двух дней до сдачи анализа.
4. За 3 часа до сдачи ПЦР на хламидии, избежать обработки гигиеническими средствами половых органов. Не проводить спринцевание или подобные процедуры у женщин.
5. Лучшее время для сдачи ПЦР на хламидиоз у девушек — середина менструального цикла.
6. Цикл приема антибиотиков и антибактериальных средств не должен совпадать или накладываться на цикл подготовки к анализу ДНК на хламидии.
7. Воздержаться от курения или употребления табака, электронной сигареты, за несколько часов до проведения теста.
8. Абсолютно исключить любое употребление спиртосодержащих напитков, жареной пищи, жиросодержащих продуктов.

После выполнения всех этих процедур, можно приступить к сдаче анализа. Процесс забора мазка для мужчин и женщин несколько различается.

Подробнее о подготовке к анализу, представлено на видео от канала «Журнал Медикал». Автор — кандидат медицинских наук С. Г. Ленкин, врач-венеролога и уролога высшей категории.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

• Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
• Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Показания для назначения исследования ПЦР

Назначение ПЦР-диагностики оправдано в случае инфекционных заболеваний и необходимости определить природу возбудителя.

Также метод ПЦР применяется при:

• необходимости точной идентификации возбудителя;
• диагностике некоторых генетических заболеваний;
• анализе образцов биопсии, исследование которых стандартными методами невозможно;
• необходимости идентификации личности путем сравнения части ДНК человека с биоматериалом заведомо известного происхождения;
• диагностике злокачественных новообразований и лейкоза;
• проведении генетических экспериментов с животными с заложенными еще до их рождения генетическими заболеваниями.

На данный момент ПЦР-анализ применяется для диагностики достаточно обширного круга заболеваний, например:

• Самых страшных заболеваний — ВИЧ-инфекции и гепатитов А, В, С, Е;
• заболеваний, передающихся половым путем (ИППП);
• туберкулеза;
• внутриклеточных инфекций (вирусы, бактерии) и многих других болезней.

Насколько точна ПЦР диагностика инфекций?

Метод ПЦР отличается высокой точностью, специфичностью и чувствительностью. Это означает, что данный анализ способен:

1. точно определить наличие или отсутствие инфекции;
2. точно указать, что именно это за инфекция (специфичность);
3. обнаружить инфекцию даже при очень низком содержании ДНК микробов в биологическом материале, который был подвергнут исследованию (чувствительность).

В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА) и других иммунологических методов диагностики инфекции, ПЦР гораздо реже дает ложно-отрицательные результаты (анализ показывает отсутствие инфекции в то время когда на самом деле она есть) и практически никогда не дает ложно-положительные результаты (анализ показывает наличие инфекции в то время когда на самом деле ее нет).

Цена

Еще один вопрос, который часто интересует пациентов: сколько стоит анализ ПЦР? Из-за новизны метода, необходимости приобретения дорогостоящего оборудования цена на тест относительно высокая. На стоимость ПЦР влияет вид инфекции, на которую будут проверять человека. Ориентировочная цена и сроки выполнения тестов следующая:

1. ИППП проверят за 1 день, цена – 400-500 рублей.
2. Герпес, ВПЧ, вирус Эпштейна-Барра, цитомегловирус выявляют за сутки, цена – 300-500 р.
3. Анализ на гепатит проводится за 5 дней, цена на качественный вариант – 500 р., количественный – 2000 р.
4. Хеликобактер пилори выявляют за сутки, цена – 400 р.
5. Антигены, антитела ВИЧ, цена – от 380 р.
6. Качественный анализ РНК ВИЧ, цена – от 3 500 р.
7. Количественный анализ РНК ВИЧ, цена – от 11 000 р.

Суть метода ПЦР

Анализ ПЦР – полимеразная цепная реакция, позволяющая многократно увеличить объем микробной среды и определить возбудителя. Явление ПЦР было открыто в 20 веке американским ученым Кэри Мюллисом, благодаря которому в разы сократилось время постановки точного диагноза, а следовательно, врачи стали быстрее назначать адекватные терапевтические мероприятия.

Суть анализа ПЦР заключается в многократном увеличении фрагментов ДНК возбудителя, полученного из биологических проб пациента (мочи, крови, слюны и других). Эта методика позволяет увеличить в искусственной среде определенные участки генетического материала при помощи специальных ферментов, к тому же количество исследуемых фрагментов растет до такой степени, что можно их визуально исследовать.

Стоит отметить, что при анализе ПЦР копируются только определенные участки, играющие важную роль в диагностике. Если они присутствуют в организме пациента в ничтожно малом количестве, то этот анализ сможет их выявить.

Методика ПЦР активно используется в медицинской практике для изучения инфекционных и наследственных заболеваний, ведь помимо простого увеличения количества генетического материала (амплификации), он позволяет сращивать отдельные фрагменты ДНК и вводить мутации, осуществляя контроль за генами, которые вызывают опасения.

Подготовка и проведение анализа ПЦР

Фрагменты ДНК микроорганизмов находятся в разных биологических средах пациента. Врачи сами определяют области взятия материалов для анализа ПЦР, которые зависят от типа заболевания и его локализации. Если вы обратились к венерологу с целью выявления инфекций, передающихся половым путем (ИППП), то будут исследованы выделения из половых органов (мазок или соскоб с шейки матки, влагалища) и мочеиспускательного канала, а также кровь и моча.

Герпетические инфекции и мононуклеоз диагностируются на основании анализа мазков из полости рта пациента. ЦМВ подтверждается после обследования мочи, спинномозговой жидкости. В отделении пульмонологии для анализа ПЦР берут мокроту и содержимое плевральной полости. У беременных при подозрении на внутриутробные инфекции плода исследуют околоплодные воды и ткани плаценты.

Чтобы исключить вероятность ошибочных результатов и повысить точность анализа ПЦР, перед сдачей биологического материала следует придерживаться несложных рекомендаций:

• Большая часть микробов вымывается вместе с мочой, поэтому перед взятием мазка из уретры не стоит мочиться;
• В течение 3-5 суток следует воздержаться от половых отношений;
• Анализ ПЦР не проводится сразу после прекращения менструальных выделений, следует подождать 5-7 дней;
• За 4 часа до сдачи слюны необходимо отказаться от приема лекарственных препаратов и пищи, а перед процедурой рекомендуется прополоскать рот водой и провести легкий массаж в области щек;
• Мочу следует собирать в утренние часы в стерильный контейнер, для исключения загрязнения материала перед его взятием следует подмыться, женщинам ввести стерильный тампон во влагалище, а мужчинам максимально оттянуть складку крайней плоти;
• За сутки до сдачи материала надо воздержаться от приема алкоголя, острой пищи и горячих процедур (сауны, бани и т.п.);
• За 2 недели до анализа ПЦР необходимо прекратить прием антибактериальных средств;
• За неделю до обследования приостанавливают использование интимных гелей, мазей и вагинальных свечей.

Это довольно простые правила, но они помогут получить максимально достоверные результаты и снизить риск ошибок в диагностике.

Взятие гинекологического мазка

Гинекологический мазок берут для оценки состояния половых путей женщины. Анализ клеток из влагалища и цервикального канала помогает выявить хронические воспаления, половые инфекции, обнаружить развитие женской онкологии на ранних стадиях.

В профилактических целях мазки берут ежегодно у всех женщин репродуктивного возраста. Внеочередной забор материала может понадобиться при:

• подготовке к беременности или процедуре ЭКО;
• появлении тревожных симптомов – зуд, жжение, высыпания, бородавки в интимной зоне, нарушение менструального цикла;
• после полового контакта с новым партнером (без барьерной контрацепции);
• при частых абортах и неоднократных выкидышах;
• после длительной терапии гормонами или антибиотиками.

Женщинам с отягощенной наследственностью мазок из шейки матки и влагалища рекомендуют сдавать 2 раза в год. Взятие мазка из половых путей женщин проводит гинеколог во время осмотра пациентки на кресле. Врач собирает биоматериал из влагалища, наружного зева матки и канала шейки матки.

Гинекологический мазок на флору

Материал помогает оценить степень микробной чистоты влагалища. Взятие мазков на флору – безболезненная процедура. Однако результаты этого анализа дают врачу важную информацию о состоянии естественной микрофлоры и заражении патогенными микроорганизмами.

Исследование позволяет диагностировать такие патологии:

• вагинит;
• гонорея;
• кандидоз;
• трихомониаз;
• цервицит и другие болезни, вызванные патогенной флорой.

Для анализа состава микрофлоры применяют метод микроскопии с окрашиванием по Граму. Методика основана на способности бактериальной клетки по-разному реагировать на контакт с анилиновыми красителями:

• Грамположительные бактерии – окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет. Эти микроорганизмы отличаются простым строением, а их клеточная оболочка очень чувствительная к воздействию антибактериальных препаратов.
• Грамотрицательные бактерии – при воздействии красителя обесцвечиваются. Их клеточная стенка имеет сложное строение. Это позволяет им сохранять устойчивость к большинству антибиотиков. Именно грамотрицательные бактерии чаще всего вызывают патологии женской половой системы.

После окрашивания по Граму и исследования материала под микроскопом, используют метод бактериологического посева клеток на питательную среду. Оказавшись в благоприятных условиях микроорганизмы начинают активно расти, образуя колонии. Эти колонии идентифицируют, после чего испытывают на чувствительность к антибиотикам

Взятие мазка на чистоту влагалища точно определяет возбудителя болезни и оценивает его чувствительность к антибактериальным препаратам разных групп.

Мазок на скрытые инфекции

Ряд заболеваний половой системы протекают без симптомов и могут никак не проявлять себя на протяжении многих лет. При этом они нарушают половую и репродуктивную функцию, вызывают бесплодие, нарушают развитие плода во время беременности.

К скрытым инфекциям относят:

• гонорею;
• сифилис;
• генитальный герпес;
• вирус папилломы человека;
• уреаплазмоз;
• хламидиоз.

После взятия мазка на скрытые инфекции, материал направляют в лабораторию для проведения ПЦР-диагностики. Техника позволяет точно определить специфические ДНК молекулы патогенных микроорганизмов. Методика очень точная и чувствительная. Даже одна микробная клетка в образце может быть выявлена во время анализа.

Взятие мазка на онкоцитологию

Это анализ клеточной структуры тканей половых органов. Взятие мазка из цервикального канала проводят при подозрении на дисплазию эпителия и онкологию. Это наиболее эффективный способ ранней диагностики злокачественных опухолей. Забор мазка из цервикального канала также информативен при хроническом воспалении и половых инфекциях.

В лаборатории мазок на онкоцитологию окрашивают и исследуют под мощным микроскопом для выявления аномалий и дефектов строения клеток. По результатам взятия мазков на цитологическое исследование пациентка получает один из пяти типов цитограмм:

• 1 класс – атипичные клетки отсутствуют (норма);
• 2 класс – выявлены воспалительные изменения структуры клеток;
• 3 класс – имеются выраженные признаки дисплазии ткани;
• 4 класс – подозрения на рак и эрозию шейки матки;
• 5 класс – онкологический процесс.